アミノ化処理を施した表面

第1級または第2級アミノ基と共有結合した表面は、既知のホモ-ヘテロ二官能性リンカー(例えば、N-ヒドロキシこはく酸イミド(NHS)やスクシニミジル4-(n-マレイミドメチル(SMCC)など)シクロヘキサン-1-カルボン酸)を介して、アミノ基、カルボキシル基またはチオール基のような反応成分を含む化合物の共有結合固定化を促進するために用いられます。 このような固定化によって、各分子の表面への物理吸着に関連した限界の一部を克服することができます。

  • 物理吸着によって弱く結合する、あるいは全く結合しない分子、すなわち小ペプチド(分子量1000~5000Da)医薬品、毒素またはホルモンの固定
  • Fab-SH抗体断片、ストレプトアビジン、多糖類や核酸(一本鎖または二本鎖)などの分子に対する偶発的な物理吸着によって特定の部位が阻害されるリスクを避け、これらの部位の完全性および近接性を確保するための分子の配向固定
  • 物理吸着と比較した場合の、自発的脱離のリスクの減少による保存性の向上

イムノアッセイ向けアミノ化処理表面の調整および使用法の概要

使用上の注意

生体分子とアミノ基をカップリングするため、いくつかの製法を定期的に使用します。特殊な用途においては、目的とする応用に関する知識が必要になります。一般的な指標として、表面のアミノ基と結合する分子の官能基との相互作用は、ホモおよびヘテロ官能性架橋剤を用いた共有結合によって生じます。
特にエチルジエチルアミノプロピルカルボジイミド(EDC)は、N-ヒドロキシこはく酸イミドの添加の有無にかかわらず、分子のカルボン酸基と表面のアミノ基の強力なカップリング剤となります。
結合させる生体分子にリシンのεアミノ基が含まれている場合の最も単純な解決法はグルタルアルデヒドを用いたカップリングです。シアノ水素化ホウ素ナトリウムで還元することにより安定なアミド結合が形成されます。
この用途の他の架橋剤としてジメチルピメリミデートおよびスベリン酸ジスクシンイミジルがあります。
Fab-SHまたはシステインペプチドとして末端にチオール基を含む生体分子はアミノ基と反応することから、架橋剤のSMCCを含むマレイミド基を数多く引き出すことができます。